Ankyrons®
使用新一代試劑，更輕鬆解決研究抗體在目標結合與偵測上的各種難題。
什麼是 Ankyrons？
Ankyrons 是一種體積小（約 15 kDa）且只有單一結合結構域的結合試劑，其設計基礎源自「ankyrin-repeat」骨架。我們利用高通量的體外篩選流程來製備 Ankyrons，從擁有約一兆種變異的 Teralibrary 中，精準挑選出高親和力的結合分子。這些結合子皆為重組製備，能提供一致性高、且應用彈性的試劑，滿足您的各類研究需求。
探索因試劑不足而受限的研究領域
我們快速成長的 Ankyron 產品目錄目前已涵蓋超過 3,000 個目標，擁有超過 16,000 個重組克隆，涵蓋 100 多個物種。對於尚未有試劑的目標，您可以免費申請將 Ankyron 克隆加入我們的目錄。在此過程中，您的目標蛋白（或特定結構域）可在我們實驗室合成，讓克隆生成更有效率且具成本效益。如需申請新的研究目標，請與我們聯繫。
Ankyrons 在研究中可以用來做抗體能做的各種實驗。
免疫螢光（Immunofluorescence）— 利用小分子與貼近目標的位置標記，取得高解析度影像
免疫組織化學——可在新鮮或 FFPE 組織中使用 Ankyrons，適合日常檢測與研究用途。
流式細胞術——可做細胞內與細胞外的染色，具有高特異性且背景雜訊低
西方墨點法 — 能偵測細胞裂解液或重組蛋白中的特定蛋白質。
ELISA──在多種 ELISA 檢測格式中，用來偵測目標物，例如蛋白質或抗體類型。
— 透過 Ankyron 技術，可進行免疫沉澱、細胞培養以及目標性遞送系統等應用。
Ankyron 的特色
✔ 高親和力
✔ 可與抗體同時使用
✔ 近距離標記能力
✔ 具成本效益，且可大量快速產生
✔ 具明確定義的單株序列
✔ 無動物來源
✔ 可客製化製作，也可提供目標蛋白的表現服務
彈性的標記與格式化方式
我們目錄中的單域 Ankyrons 預設都具有 6His 標籤 和 V5 表位標籤，可使用我們的 抗 V5 次級試劑 進行標記。依照您的應用與研究目的，V5 標籤也可以更換成多種其他標記，包括 直接螢光標記 或 生物素（biotin） 等。
Ankyron 的應用
免疫螢光染色
Ankyrons 在免疫螢光染色中提供優異的染色品質。由於它們體積小，螢光標記能夠靠近結合位點，使成像解析度 更高。此外，小尺寸的特性也讓細胞滲透處理更溫和，染色與洗滌步驟更短。與使用抗體的免疫螢光染色程序相比，標準的 Ankyron 染色流程速度明顯更快，可為您節省超過一小時的實驗時間。可在此查看我們的 Ankyron 實驗操作流程。
在免疫螢光染色中，可標記細胞外、細胞內及細胞核的目標
ICAM2
Clathrin
Histone
圖說：由左至右——Huvec 細胞：使用針對 ICAM2 的克隆染色，ICAM2 是細胞表面分子，也是白血球黏附蛋白 LFA-1 的配體。HCT116 細胞：使用針對 Clathrin Heavy Chain 1 的克隆染色，這是網格蛋白複合體的關鍵成分，參與細胞內運輸及有絲分裂時的紡錘體組裝。HeLa 細胞：使用針對 Histone H3.1（AE40370 克隆） 的染色，作為核小體的標記。
使用 Ankyrons 染色時，可減少封閉步驟並節省實驗流程時間
合作亮點：Mosquito 的 NF-κB 途徑
圖說：使用針對蚊子 REL1A 的 BT40163 克隆染色，REL1A 是埃及斑蚊（Aedes aegypti）NF-κB 途徑的成分，也是抗病毒反應的重要部分。數據由 Pirbright 研究所的 Dr. Kevin Maringer 提供。
精選文獻：使用 Anti-Gabarap 1 Ankyrons 進行 P. berghei 研究
圖說：使用針對 Gabarap 的 Ankyron（克隆 AH50324）進行免疫螢光分析。HeLa 細胞被 Plasmodium berghei 感染，寄生蟲透過辨識寄生泡膜（PVM）蛋白的抗體呈現（UIS4，品紅色）。第一排顯示野生型 HeLa 細胞使用 Gabarap 1 特異性 Ankyron 的染色情況。第二排顯示 Gabarap 敲除 HeLa 細胞的相同染色。Gabarap 特異性 Ankyron 的訊號以綠色呈現。先前的 Gabarap-GFP 過度表達實驗顯示，Gabarap 定位於寄生泡膜（PVM）。
數據由瑞士伯爾尼大學細胞生物學研究所的 Dr. Jacqueline Schmuckli 與 Prof. Volker Heussler 提供。
J. Schmuckli-Maurer 等，《Communications Biology》（2024），第 7 期，文章編號 1554，「Plasmodium berghei 肝臟期寄生蟲利用宿主 GABARAP 蛋白活化 TFEB」
流式細胞術
在流式細胞術中，可對難以接觸的目標進行定量與評估。由於分子量小，Ankyrons 具有高效穿透細胞的優勢，可在不需強烈滲透處理的情況下，檢測細胞內及細胞核目標。
圖說：流式細胞術分析 HCT116、HeLa 與 HUVEC 細胞，使用 Ki67 特異性 Ankyron 克隆 DS40118 預先與抗 V5-APC 偶聯。HCT116 細胞的增殖速度快於 HeLa 細胞，而 HUVEC 的倍增時間比前兩者都長，因此 Ki67 水平較低。
圖說：顯微鏡下 HeLa 細胞核中的 Ki67，使用 V5 標記的 Ki67 特異性 Ankyron 克隆 DS40112（紅色）檢測，細胞核以 DAPI（藍色）對比染色，F-actin 則以 phalloidin（綠色）標示。
合作亮點：腫瘤學中的 HIF-1α 結合蛋白
圖說：使用 HIF-1α 轉錄因子特異性 Ankyron（克隆 AW40110）對 C57BL/6 小鼠的 NK 細胞進行流式細胞術染色。C57BL/6 小鼠被注射 MC38 腫瘤細胞後，從腫瘤和脾臟中分離 NK 細胞並染色 HIF-1α。Ankyron 克隆 AW40110 的染色結果清楚顯示，脾臟中的 HIF-1α 表達量低，而腫瘤中的 NK 細胞則表達升高。數據由英國伯明翰大學 Prof. Dave Withers 提供。
免疫組織化學（IHC）
使用 Ankyrons 染色新鮮組織與石蠟包埋（FFPE）組織切片，具有高效的組織穿透能力
在石蠟包埋（FFPE）組織切片上進行免疫組織化學（IHC）：使用 10 μg/ml 的 V5 標記 Ankyron 和 抗 V5 HRP（1:500），以 DAB（棕色） 顯色，並以 血球素（藍紫色） 對細胞核進行對比染色。抗原修復採 熱介導法（10 分鐘），使用 Leica Tris-EDTA 緩衝液（pH 9），並透過 Leica BOND RX 切片染色系統 執行。
免疫組織化學亮點：在人類結腸組織中進行 APRIL 特異性染色
背景APRIL（促增殖配體）是腫瘤壞死因子（TNF）配體超家族的一員（TNFSF13，也稱為 CD256），在體液免疫中扮演重要角色。它透過與受體 TACI（TNFRSF13B） 和 BCMA（TNFRSF17） 的互動，調控 B 細胞的成熟、增殖與存活。在病理狀況下，APRIL 參與系統性自體免疫疾病的發展，例如紅斑性狼瘡和類風濕性關節炎。與 TNF 超家族的許多其他配體不同，APRIL 也能刺激癌細胞生長，並可能在腫瘤形成期間表達過高。因此，APRIL 不僅是一個有用的診斷標誌，也是在自體免疫疾病、免疫球蛋白疾病及癌症中的潛在治療靶點。
圖說：對石蠟包埋的人類結腸組織進行免疫組織化學分析，使用 10 μg/ml 的 V5 標記 Ankyron® TNF13_HUMAN_ANK03668_3 及 抗 V5 HRP（1:500），以 DAB（棕色） 顯色，並用 血球素（藍紫色） 對細胞核進行對比染色。抗原修復採 熱介導法，使用 Leica Citrate 緩衝液（pH 6）。
觀看我們的簡報：Ankyron 技術介紹
美國 FDA 精選文獻：具有功能性作用的高特異性 COVID Ankyrons
圖說：使用生物層干涉儀（Biolayer Interferometry）展示 Ankyron 克隆對 SARS-CoV-2 刺 突蛋白的特異性
Ankyrons 對抗病毒逃逸突變的保護效果與臨床評估的單株抗體相當。Ankyrons 的高通量生成能力，使其在快速開發針對流行病和大流行病毒的中和劑方面具有巨大潛力。
圖說：使用假病毒中和實驗測定每種 Ankyron 對 SARS-CoV-2 的中和效價，實驗在 ACE2/TMPRSS2 過度表達的 HEK293 細胞中進行。在 此例中，Delta 假病毒（1.0 × 10⁶ RLU/mL）與針對不同變異株的 Ankyron 進行 3 倍梯度稀釋孵育。
YJ Park 等，《The AAPS Journal》（2025），第 27 卷，第 58 頁，「稱為 Ankyrons 的小型 Ankyrin 重複蛋白對 SARS-CoV-2 變異株的功能活性與結合特異性」
精選動物健康文獻：全球首個專一於牛 IgG3 的結合試劑
研究畜牧免疫學對促進永續農業、改善人畜共通傳染病防控以及確保食品安全非常重要。牛隻 IgG3 亞型 在免疫中的角色此前尚未被明確描述。市售針對 IgG3 的抗體要麼無法有效結合，要麼會與其他 IgG 亞型交叉反應。我們的 Ankyron 技術 成功開發出全球首個專一於 IgG3 的結合試劑，從而能夠詳細解析小牛接種口蹄疫病毒衣殼疫苗後的免疫反應。
圖說：Ankyron® AZS40101 可用作 ELISA 實驗中的捕獲或檢測試劑。Ankyron™ AZS40101 被用作 ELISA 捕獲試劑（A） 或 檢測試劑（B），以檢測重組牛 IgG1、IgG2 與 IgG3 單株抗體。圖中顯示的是技術重複樣本的平均值 ± 標準差（SD）。
參考文獻A. Noble 等，《Vet. Immunol. Immunother.》（2024），第 278 卷，110852，「使用生物層干涉儀展示 Ankyron 克隆對 SARS-CoV-2 刺突蛋白的特異性」。
Ankyron 技術帶來的更多彈性應用
引導式篩選與 p-MHC 特異性結合蛋白
使用我們的 引導式篩選策略，即使是高度同源的目標蛋白，只差單一氨基酸也能區分。在我們的開發流程中，可同時篩選兩種蛋白目標，並剔除與非目標蛋白結合的克隆，從而得到 選擇性反應的 Ankyron 結合蛋白。這種篩選策略的關鍵應用範例包括 肽-MHC 特異性 Ankyron 以及 同型抗體（idiotype）特異性 Ankyron。
多聚體 Ankyrons
Ankyrons 作為具有明確單株序列的重組蛋白，其特性擴展了合成高度客製化結合試劑的可能性。一個主要應用範例是 多聚體 Ankyrons 的開發，可利用連接子（linker）將多個相同特異性的 Ankyrons 連接在一起，或製作 多價結合蛋白。
Ankyrons 與抗體的並列比較
訂購訊息
訂購專線：02-26686845
E-mail：yaohong@yh-bio.com.tw
Line ID：yaohong26686845